بیان کاست ژنی blf۱-stxb در باکتری e. coli و بررسی تیترآنتی بادی در موش

نویسندگان

مهدی مسعودی کرهرودی

mehdi masoudi kerahroudi دانشگاه جامع امام حسین(ع) حسین هنری

hossien honari دانشگاه جامع امام حسین(ع) مسعود عبدالهی

masoud abdollahi دانشجوی کارشناسی ارشد سلولی مولکولی، مرکز تحقیقات زیست شناسی، دانشگاه جامع امام حسین(ع)

چکیده

زمینه و هدف: یکی از راه­ های تقویت اثر واکسن­ ها استفاده از ادجوانت­ ها می ­باشد. stxb شیگلا دارای نقش ادجوانتی و حاملی بوده و می ­توان با ممزوج کردن آنتی ­ژن ­های کاندیدای واکسن با این ادجوانت به تولید واکسن مناسب پرداخت. blf1نقش مهمی در بیماری­ زایی و ایجاد عفونت توسط بورخولدریا سودومالئی دارد. هدف این مطالعه، بیان ژن blf1-stxb در باکتری e. coli  و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش می ­باشد. روش کار: ژن صناعی در پلاسمید puc57 از شرکت ندای فن خریداری شد. پلاسمید puc57 حاوی ژن blf1 با جایگاه­ های آنزیمی bamhi وsali در وکتور بیانی pet28a(+)-stxb زیرهمسانه­ سازی گردید و به باکتری e. coli سویه bl21(de3) تراریخت (ترانسفورم) شد. بیان کاست ژنی blf1-stxb تحت القایiptg  انجام گردید.  بعد از تخلیص پروتئین نوترکیب با ستون کروماتوگرافی، چهار نوبت متوالی به موش سوری تزریق شد. یافته ها: در این مطالعه، ژن blf1-stxb کلون شده در وکتور بیانی pet28a(+) به وسیله ­ی pcr و آنالیز آنزیمی تأیید گردید. همچنین پروتئین نوترکیب تولید شده به وسیله sds-page و لکه ­گذاری وسترن تایید شد. سپس آنتی ­بادی تولید شده از سرم موش جداسازی و توسط تست الایزا تایید گردید. نتیجه ­گیری: با توجه به اینکه پروتئین blf1 توانایی توقف پروتئین­ سازی و stxb دارای نقش ادجوانتی است. این پروتئین نوترکیب می­ تواند به عنوان کاندیدای واکسن علیه بورخولدریا سودومالئی و شیگلا دیسانتری مورد استفاده واقع شود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بیان کاست ژنی blf1-stxB در باکتری E. coli و بررسی تیترآنتی بادی در موش

Background and Objectives: One of the ways to strengthen the effect of vaccines is using the adjuvant. STxB has a carrier and adjuvant role that we can fuse it with vaccine candidate antigens and produce efficient vaccines. BLF1 has a role in the pathogenesis and infection by Burkholderia pseudomallei, that can be studied when fused with stxB.The aim of this study expression blf1-stxB gene Cass...

متن کامل

همسانه سازی، امتزاج و بررسی بیان کاست ژنی ctb و n ترمینال ipad در e. coli

زمینه و هدف: شیگلا دیسانتری یکی از عوامل اصلی بیماری اسهال در انسان بوده که علیه آن واکسن وجود ندارد. یکی از مهم ترین فاکتورهای بیماری زای موجود در شیگلا، پروتئین ipad است. همسانه سازیn ترمینال ژن ipad به همراه ژن ctbکه دارای نقش ادجوانتی و حاملی می باشد به شکل یک واکسن نوترکیب می توان سبب تقویت پاسخ ایمنی مخاطی شود. مواد و روش ها: طراحی پرایمر برای ژن های ipad و ctb بر مبنای طراحی انجام شده بر...

متن کامل

زیرهمسانه‌سازی و بیان ژن ممزوجی M‌L1-stxB دارواش در E. Coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری

زمینه و هدف: عصاره برگ‌های دارواش (Viscum album L) دارای پروتئین MLI از نوع RIP2 (پروتئین‌های غیرفعال ریبوزومی تیپ 2) با خواص لکتینی هستند. STxB شیگا توکسین به‌عنوان یک ایمونواجوانت و حامل، مطرح بوده و به گیرنده سطح سلولی خود به‌نام Gb3 متصل می‌گردد که روی اکثر سلول‌های بدن بیان می‌شود. در این مطالعه، بیان آنتی‌ژنML1-stxB  در E. coli و تولید آنتی‌بادی آن در موش سوری بررسی گردید. روش بررسی: در ا...

متن کامل

بررسی ایمنی‌زایی پروتئین نوترکیب (STxB) شیگلا دیسانتری تیپ 1 در موش سوری

زمینه و هدف: شیگلوز عفونت حادّ روده‌ای حاصل از شیگاتوکسین و توکسین‌های شبه شیگاست که توسط باکتری شیگلا و باکتری اشرشیا کلی انتروهموراژیک (EHEC) و اشرشیا انتروتوکسینوژنیک (ETEC) ایجادمی‌شود. این بیماری، میزان شیوع بالایی در جهان دارد و به‌عنوان یک عامل بیوتروریستی شناخته می‌‌شود. هدف از این مطالعه بررسی ایمنی‌زایی پروتئین نوترکیب STxB و نانوالیاف حاوی پروتئین STxB به صورت تجویز نازالی و تزریقی م...

متن کامل

زیر همسانه سازی و بیان ژن SO9 گیاه غاسول صابونی در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری

: غاسول صابونی دارای ایزوفرم های مختلف پروتئین ساپورین می باشد. ساپورین جزء پروتئین های غیر فعال کننده ریبوزومی (RIPs) است. ایزوفرم SO9 ساپورین ها، آدنین 4324 موجود در توالی حفاظت شده GAGA را دپورینه کرده و باعث اختلال در پروتئین سازی می‌گردد. در این مطالعه بیان ایزوفرم SO9 در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری انجام شد. روش بررسی: ژن SO9 سنتز شده، از پلاسمید pUC57-SO9 نوترکیب...

متن کامل

همسانه سازی و بیان ژن مولد پپتید AcAMP از قارچ Aspergillus clavatus در باکتری E. coli و بررسی تیتر آنتی بادی آن در موش سوری

Background: Antimicrobial peptides have been considered as the key to change in the current antibiotics. AcAMP, Antimicrobial peptide is one of them, which has been purified from the Aspergillus clavatus ES1 fungus, and its biochemical properties and characterization indicate that this peptide has unique properties. The aim of this study was to express the gene of AcAMP peptide in Escherichia c...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزد

جلد ۲۴، شماره ۱۱، صفحات ۸۷۶-۸۸۶

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023